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成骨细胞矿化结节染色常用方法有四环素法和茜素红S法，应用茜素红溶液对成骨细胞染色，茜素红可与钙离子螯合，产生深红色或紫红色的复合物，可用于鉴定干细胞是否已成功向成骨细胞分化。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

骨代谢是破骨细胞骨吸收与成骨细胞骨形成的动态平衡过程，成骨细胞负责骨基质的合成、分泌、矿化，是骨重建激活或终止的控制者，它在骨组织的创伤修复、骨组织的生长发育、骨量平衡中起着重要作用，是骨质疏松、骨折等骨病研究的主要焦点。成骨细胞分化是其主导骨形成的前提与基础，在成骨分化过程中其最基本的生物学特征是骨基质合成、分泌、矿化及成熟，而矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志，同时也是成骨细胞行使成骨功能的主要形态学表现，观察成骨细胞的矿化结节是研究成骨细胞分化的常用手段之一。

• 茜素红S染色时间要根据钙盐的含量来确定，一般情况下30min即可。
  
• Ob固定液宜挥发，开启后应密封保存；如使用量大可用95%乙醇替代。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 成骨细胞经培养，胰酶消化，接种培养于6孔板中，每孔有1×10⁵个细胞。
  
• 细胞连续观察、换液，培养14天。
  
• 小心吸除培养液，加入足量Ob固定液固定15min。
  
• 磷酸盐缓冲液(1×PBS)洗涤各孔3次，每次3min。
  
• 加入茜素红S染色液染色30min，可根据染色情况酌情增加或减少染色时间。
  
• 蒸馏水洗去染色液，肉眼可见细胞呈明显的紫红色。
  
• 光镜下观察拍照。